14. Ulusal Histoloji ve Embriyoloji Kongresi 10-13 Mayıs 2018, Antalya - Türkiye, Antalya, Türkiye, 10 Mayıs - 13 Ekim 2019, cilt.6, no.65, ss.141-143
Amaç: Bu çalışmanın amacı ve Vücut Kitle İndeksleri (VKİ)’lerine göre kadın hastaların granüloza
hücrelerinde leptin, ghrelin immunfloresan ekspresyonlarının incelenmesi ve VKİ'nin gebelik
durumuna etkisinin incelenmesidir.
Yöntem: Çalışmamıza katılan 86 kadın hastanın onamları alındı. Hastaların kilo ve boyları, Oosit
toplama işlemi (OPU) günü ölçüldü ve VKİ’leri hesaplandı. Dünya Sağlık Örgütüne göre; VKİ<25
Normal Kilolu (N), 25-29 Fazla Kilolu (FK), >30 Obez (OB) olarak kabul edildi. Çalışmaya katılan 86
kadın hastanın 29'u N, 27'si FK, 30'u OB olarak gruplandırılmıştır. Hastaların yaşları kaydedildi.
Hastalara antagonist kontrollü ovaryen hiperstimülasyon uygulandı. Yumurta çatlatma iğneleri hCG
uygulandıktan 36 saat sonra OPU gerçekleştirildi. Folikül aspirasyon işleminde yıkama yapılmadı,
standart yöntemlerle OPU tamamlandı. Embriyoloji Laboratuvarında seçilen oositlere intra
sitoplazmik sperm enjeksiyonu yapıldı ve bu işlemden 24 saat sonra döllenme olup olmadığı ve
embriyo transferinden sonra gebeliğin gerçekleşip gerçekleşmediği kontrol edildi.Folikül sıvısındaki
oositler toplandıktan sonra, sıvıda bulunan granüloza hücreleri coversliplere (Coverslip BD BioCoat
Poly-D-Lysine12 mm 354086) yayıldı. %3’lük soğuk (+4℃ ) formaldehit ile fikse edildi. Leptin ve
Ghrelin immünfloresan tekniği, kit protokolüne göre çalışıldı. İmmun (+) hücreler, Olympus IX 53
immunfloresan mikroskopta incelendi ve fotoğrafları çekildi. Fero Lab (Fred Hutcinson Cancer
Research Center; Seattle, WA, ABD) tarafından önerilen hücre sayım protokolü temel alınarak NIH
(National Institues of Health) tarafından oluşturulan Java™ temelli NIH ImageJ programı (NIH,
Maryland, ABD) analiz ve sayısallaştırma için kullanıldı. İstatistiksel değerlendirme, IBM SPSS 20.0
(SPSS Inc.,Chicago, IL, USA) paket programı ile yapıldı.
Bulgular: Çalışmaya katılan kadın hastlarda yaş ile N, FK, OB grupları arasında istatistiksel olarak
anlamlı bir farklılık bulunamadı (p = 0,474) Kadın hastaların VKİ’leri arttıkça, gebelik oranlarında
azalma N:%43,33, FK:%36,67, OB%20 olarak belirlendi. İmmünfloresan boyamada, Leptin (+)
granüloza hücreleri açısından N hasta grubuna göre FK ve OB hasta grubunda daha fazla (+)
boyanan hücre gözlendi. Leptin (+) granüloza hücreleri ile kadın VKİ arasında anlamlı farklılık
saptandı (p<0,01). Çalışmamıza katılan hastalardaki leptin(+)hücrelerin yüzdesinin kadın (VKİ)
arttıkça arttığı görüldü (N:21,88 FK:31,25, OB:40,88). Ghrelin (+) granüloza hücreleri açısından
Obez hasta grubunda daha fazla immunfloresan hücrelere rastlandı ancak çalışmaya katılan N, FK,
OB hasta grupları arasında Ghrelin(+) granüloza hücreleri açısından istatistiksel olarak anlamlı bir
farklılık bulunamadı (p = 0,350). Ghrelin(+) granüloza hücrelerin yüzdesinin obeziteyle arttığı
gözlendi (N:31,82 FK:31,82, OB:36,36). Ghrelin(+) ile leptin(+) arasında pozitif anlamlı korelasyon
saptandı (r: 0,344, p: 0,001).
Sonuçlar: Obezitenin hormonlar ve sitokinler üzerinden oosit ve embriyo kalitesi, gebelik ve doğum
oranları üzerine negatif etkileri olduğu anlaşılmaktadır. Polikistik Over Sendromu dışlanarak sadece
obezitenin etkilerini gösteren çalışmamızda elde edilen bulguların literatüre özgün katkılar
sağlayacağını umuyoruz.
Anahtar Kelimeler: Granüloza hücreleri, Ghrelin, İnvitro fertilizasyon, Leptin, Obezite